(1)其擴大生產的方法常有三種:固體靜置培養法、振蕩培養法和大罐通氣發酵培養法。 a.靜置培養:主要用在固體培養,如試管斜面、三角瓶培養、米飯培養等等。在靜置培養中只要掌握好溫度和光照即可使菌正常生長。當斜面上的分生孢子成熟后,即可存入1一2℃的冰箱中保存8一14個月,也可作為種子直接用于生產。 b.振蕩培養:采用液體培養菌種或小規模繁殖培養,都可用振蕩培養。振蕩培養的培養基,把固體培養基減去瓊脂即可。設備最好選用恒溫振蕩培養機,用三角瓶置液體培養基,把試管固體菌種接入即可培養。經不斷振蕩使液體培養基中各種成分混合均勻而不致沉淀,同時促進氣體與液體接觸和交換,使氧進入液體培養基中,利于菌絲生長和分生孢子形成。 c.大罐通氣發酵培養:在大規模生產菌絲和分生孢子等菌粉時,必須用大罐通氣發酵培養法。該方法通氣是采用吸氣或真空泵減壓等方法,經過濾器除雜菌,送入罐內液體培 養基中供冬蟲夏草菌的生長發育。 (2)發酵工藝流程。自然冬蟲夏草分離純化→ 試管斜面種→ 振蕩器液體一級 種→ 二級種→ 小型種子發酵種子罐→ 生產發酵罐 → 濃縮→ 噴粉干燥→ 成品菌粉。 冬蟲夏草菌罐中發酵要求溫度在20一25℃,罐壓392.3一686.5kPa(0.4一0.7kg/cmz),通氣量為0.5一1.OVVm*;注入發酵罐中的液體培養基為罐容的65%一75%為宜。 接種量為10%,攪拌速度為180r/min,培養時間72一96h,即可放罐濃縮和噴粉。 (3)發酵培養基多用。鮮馬鈴薯 (去皮)8%,蔗糖2%,玉米淀粉0.5%,蠶蛹粉1%,蛋白胨0.4%,硫酸銨0.2%,pH值5.5一6.0。 (4)發酵培養成品標準。分生孢子即幾全脫落母體孢子梗,孢子梗數量增加不明顯 時,在鏡下計數檢查,每毫升含分生孢子18億一25億個;殘糖低于1%;氨基氮低于0.2mg/mL,即可成為成品菌液。 4.冬蟲夏草菌回接要點 把有性型或無性型的冬蟲夏草菌孢子回接到寄主昆蟲體上,是人工培養有性型冬蟲夏草和復壯無性型菌種的關鍵措施。
你好,冬蟲夏草菌的分離培養中須掌握溫度、pH值、光照、碳和氮源及無機鹽的利用狀況。 (1)不同溫度對菌絲生長的影響。冬蟲夏草菌喜偏低溫度。在0一4℃時能緩慢生長;5一8℃時生長速度加快;10一19℃是此菌較適生長發育的范圍;最佳生長溫度為15一l9℃。超過20℃菌絲猛長,菌落由白色變為灰黑或棕黃色,開始出現變異,所以不宜高溫培養。 (2)對pH值的要求。冬蟲夏草菌是一種偏酸性真菌,最適pH值為5.0一6.0,當pH值為4.5以下和6以上時,隨著增高或降低,生長緩慢至不生長。 (3)光照的影響。此菌的子囊孢子萌發和菌絲生長初期,適應于弱光和短光照,后期則適應于較強光照。在人工培養中,菌絲、分生孢子和子座等具有明顯的趨光性,向陽面生長多而密,背光面生長稀疏,全黑環境下培養的各種菌態纖弱、細長、稀疏。 (4)對碳源的利用。冬蟲夏草菌可利用多種碳源,但以葡萄糖和麥芽糖合用時生長最快,單用葡萄糖時也能良好地生長,次之是馬鈴薯等淀粉,再次之是蔗糖。 冬蟲夏草菌是一種由寄生活體寄主,再由腐生階段發育成熟的真菌,所以對氮源中的多種有機氮均能較好的利用。而以活蟲體最佳;蛋白胨與酵母膏合用生長也十分理想,次之是二者單獨使用,再次之是牛肉膏等。而對無機氮如硫酸銨、硝酸鉀等利用較差。 對灰分養料有一定的需求,在有微量的硫酸鎂、磷酸氫二鉀的培養基中生長旺盛,次之是磷酸二氫鉀,其他鈉、鈣、鐵、銅等無機鹽也可利用。希望我的回答對你有所幫助
受真菌感染的幼蟲,逐漸蠕動到距地表二至三厘米的地方,頭上尾下而死。這就是“冬蟲”。幼蟲雖死,體內的真菌卻日漸生長,直至充滿整個蟲體。來年春末夏初,蟲子的頭部長出一根紫紅色的小草, 高約二至五厘米,頂端有菠蘿狀的囊殼, 這就是“夏草”。