1)預熱儀器。為使測定穩定,將電源開關打開,使儀器預熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷。
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2)選定波長。根據實驗要求,轉動波長調節器,使指針指示所需要的單色光波長。
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3)固定靈敏度檔。根據有色溶液對光的吸收情況,為使吸光度讀數為0.2-0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
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4)調節“0”點。輕輕旋動調“0”電位器,使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時,比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)。
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5)調節T=100%。將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內,有色溶液放在其它格內,把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉動光量調節器,使透光度T=100%,即表頭指針恰好指在T=100%處。
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6)測定。輕輕拉動比色皿座架拉桿,使有色溶液進入光路,此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A。讀數后,打開比色皿暗箱蓋。
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7)關機。實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。
分光光度計其波長范圍360~800nm,色散元件為三角棱形.
1.檢查儀器各調節鈕的起始位置是否正確,接通電源開關,打開樣品室暗箱蓋,使電表指針處于“0”位,預熱20min后,再選擇須用的單色光波長和相應的放大靈敏度檔,用調“0”電位器調整電表為T=0%。
2.蓋上樣品室蓋使光電管受光,推動試樣架拉手,使參比溶液池(溶液裝入4/5高度,置第一格)置于光路上,調節100%透射比調節器,使電表指針指T=100%。
3.重復進行打開樣品室蓋,調0,蓋上樣品室蓋,調透射比為100%的操作至儀器穩定。
4.蓋上樣品室蓋,推動試樣架拉手,使樣品溶液池置于光路上,讀出吸光度值。讀數后應立即打開樣品室蓋。
5.測量完畢,取出比色皿,洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置,電源開關置于“關”,拔下電源插頭。
6.放大器各檔的靈敏度為:“l” ×1倍;“2”×10倍;“3”×20倍,靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時,光能量不同,需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調到T= 100%處時,盡量使用靈敏度較低的檔,以提高儀器的穩定性。改變靈敏度檔后,應重新調“0”和“100”。
開光譜儀電源
2 開計算機電源
3 在文件管理器中用鼠標指按UV WinLab圖標,此時出現UV WinLab的應用窗口,儀器已準備好,可選用適當方法進行分析操作.
2 方法:在分析中必須對分光光度計設定一些必要的參數,這些參數的組合就形成一個“方法”.Lambda系列UV WinLab軟件預設四類常用方法.
1)掃描(SCAN),用以進行光譜掃描.
2)時間驅動(TIME DRIVER),用以觀察一定時間內某種特定波長處縱坐標值的變化,如酶動力學.
3)波長編程(WP)用以在多個波長下測定樣品在一定時間內的縱坐標值變化,并可以計算這些縱坐標值的差或比值.
分光光度計正確操作使用方法:
1.接通電源,打開儀器開關,掀開樣品室暗箱蓋,預熱10分鐘。
2.將靈敏度開關調至“1”檔(若零點調節器調不到“0”時,需選用較高檔。) 3.根據所需波長轉動波長選擇鈕。
4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內,使空白管對準光路。
5.在暗箱蓋開啟狀態下調節零點調節器,使讀數盤指針指向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋,調節“100”調節器,使空白管的t=100,指針穩定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測定管的光密度值,并記錄。
7.比色完畢,關上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。