721型分光光度計其波長范圍360~800nm,色散元件為三角棱形. 1.檢查儀器各調(diào)節(jié)鈕的起始位置是否正確,接通電源開關(guān),打開樣品室暗箱蓋,使電表指針處于“0”位,預熱20min后,再選擇須用的單色光波長和相應(yīng)的放大靈敏度檔,用調(diào)“0”電位器調(diào)整電表為T=0%。 2.蓋上樣品室蓋使光電管受光,推動試樣架拉手,使參比溶液池(溶液裝入4/5高度,置第一格)置于光路上,調(diào)節(jié)100%透射比調(diào)節(jié)器,使電表指針指T=100%。 3.重復進行打開樣品室蓋,調(diào)0,蓋上樣品室蓋,調(diào)透射比為100%的操作至儀器穩(wěn)定。 4.蓋上樣品室蓋,推動試樣架拉手,使樣品溶液池置于光路上,讀出吸光度值。讀數(shù)后應(yīng)立即打開樣品室蓋。 5.測量完畢,取出比色皿,洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置,電源開關(guān)置于“關(guān)”,拔下電源插頭。 6.放大器各檔的靈敏度為:“l(fā)” ×1倍;“2”×10倍;“3”×20倍,靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時,光能量不同,需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調(diào)到T= 100%處時,盡量使用靈敏度較低的檔,以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后,應(yīng)重新調(diào)“0”和“100”。
723分光光度計使用步驟:
1.接通電源,打開儀器開關(guān),掀開樣品室暗箱蓋,預熱10分鐘。
2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1”檔(若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時,需選用較高檔。)
3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。
4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內(nèi),使空白管對準光路。
5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器,使讀數(shù)盤指針指向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋,調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器,使空白管的t=100,指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測定管的光密度值,并記錄。
7.比色完畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。
1)預熱儀器。為使測定穩(wěn)定,將電源開關(guān)打開,使儀器預熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照。預熱儀器時和在不測定時應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷。
2)選定波長。根據(jù)實驗要求,轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器,使指針指示所需要的單色光波長。
3)固定靈敏度檔。根據(jù)有色溶液對光的吸收情況,為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
4)調(diào)節(jié)“0”點。輕輕旋動調(diào)“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時,比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)。
5)調(diào)節(jié)T=100%。將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的第一格內(nèi),有色溶液放在其它格內(nèi),把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器,使透光度T=100%,即表頭指針恰好指在T=100%處。
6)測定。輕輕拉動比色皿座架拉桿,使有色溶液進入光路,此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A。讀數(shù)后,打開比色皿暗箱蓋。
7)關(guān)機。實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。